对于怀孕阶段的准妈妈来说，按时进行各种孕期检查是保证母胎健康的重要手段。在整个孕期中有多项检测，介入性产前诊断是其中比较特殊的一项。在临床中，介入性产前诊断是胎儿染色体检查和单基因遗传病诊断的主要方法，其操作流程为：在超声波的引导下经孕妇腹部对胎儿相关样本（绒毛、羊水、脐血）进行提取，然后进行细胞培养、分子遗传学或生化遗传学检查，最后进行染色体诊断或基因诊断。
目前，常见的介入性产前诊断技术包括羊膜腔穿刺、绒毛穿刺、经皮脐血穿刺等。由于这些穿刺过程不可避免的经过母体，存在母源细胞污染（maternal cell contamination，MCC）的风险，再加上后续染色体检查和基因诊断存在基因扩增，这使得微量的母体组织污染都可能严重干扰诊断结果，造成严重的临床后果。
MCC普遍存在
MCC干扰结果判定
因此，鉴定所取胎儿组织是否存在MCC是产前诊断分子遗传实验室必需具备的鉴别技术。临床中，MCC的排查方法经历了以下几个阶段：
01 Kleihaure抗酸染色法
该方法是鉴别母血与胎血的传统技术，技术原理是胎儿血红蛋白比成人血红蛋白更能抵抗酸变性[5]。Kleihaure抗酸染色法广泛应用于母婴溶血、妊娠期间外伤及阴道出血等临床检测，具有操作简单、成本低廉等优点。然而，如果母体血液中胚胎血红蛋白含量异常升高，如镰状细胞病或部分β地中海贫血病，染色过程中就会出现将母血误鉴为胎儿血的错误结果。在18例用Kleihaure抗酸染色技术鉴定实验中，至少有2例将母血错误地鉴定为胎儿血[6]。
02 流式细胞术
该技术于70年代初发展起来，其工作原理是采用激光作为激发光源，利用荧光染料与单克隆抗体技术标记母源或胎源细胞，结合计算机系统对流动的单细胞悬液中单个细胞的多个参数信号进行数据处理分析，以此对细胞进行区分。相比Kleihaure抗酸染色法，流式细胞术具备快速、灵敏和特异的特点，但也存在仪器价格昂贵、操作繁琐等弊端[7]。
03 短串联重复序列
短串联重复序列(short tandem repeat,STR)是人类基因组DNA中广泛存在的一类具有高度多态性和遗传稳定性的遗传标序列，核心序列为2-6个碱基，经过几次到几十次串联重复，构成特定的DNA片段遗传标记。个体同一等位基因上这种序列重复次数不同，呈多态性并按孟德尔规律呈共显性遗传，因此选取几个STR位点可作为一有效个体识别标志，具有极强的特异性[8]。结合PCR技术，使得此技术具有极强的灵敏度。选取具有高杂合度和高多态性的STR位点，应用多重PCR对羊水、脐血等进行母血污染鉴定，具有极强的灵敏度，结果准确可靠[9]。目前，《低深度全基因组测序技术应用于产前诊断中的专家共识》明确建议，可使用STR检测对产前样本进行MCC判断[10]。
随着分子时代的到来，STR检测的优势愈发突出，该技术准确、便捷、快速、低价，适宜在各级医院及实验室进行推广，具有广阔的应用前景。尤其在产前诊断方面，STR检测可用于MCC排查、单亲二体疾病辅助诊断、非整倍性染色体疾病快速诊断等，其临床价值受到临床医生越来越多的肯定。
参考文献：
1. Winsor EJ, Silver MP, Theve R, Wright M, Ward BE. Maternal cell contamination in uncultured amniotic fluid. Prenat Diagn. 1996 Jan;16(1):49-54. doi: 10.1002/(SICI)1097-0223(199601)16:1<49::aid-pd808>3.0.CO;2-U. PMID: 8821852.
2. Van Opstal D, Boter M, de Jong D, van den Berg C, Brüggenwirth HT, Wildschut HI, de Klein A, Galjaard RJ. Rapid aneuploidy detection with multiplex ligation-dependent probe amplification: a prospective study of 4000 amniotic fluid samples. Eur J Hum Genet. 2009 Jan;17(1):112-21.
3. Wang Y , Li Y , Chen Y , et al. Systematic analysis of copy‐number variations associated with early pregnancy loss[J]. Ultrasound in Obstetrics & Gynecology, 2020, 55(1)）。
4. Stojilkovic-Mikic T, Mann K, Docherty Z, Mackie Ogilvie C. Maternal cell contamination of prenatal samples assessed by QF-PCR genotyping. Prenat Diagn. 2005 Jan;25(1):79-83. doi: 10.1002/pd.1089. PMID: 15662689.
5. Martel-Petit V , Petit C , Marchand M , et al. Use of the Kleihauer test to detect fetal erythroblasts in the maternal circulation[J]. Prenatal Diagnosis, 2001.
6. Holcomb W L , Gunderson E , Petrie R H . Clinical use of the Kleihauer-Betke test[J]. Journal of Perinatal Medicine, 1990, 18(5):331-337.
7. Fernandes B J , Dadelszen P V , Fazal I , et al. Flow cytometric assessment of feto-maternal hemorrhage; a comparison with Betke-Kleihauer[J]. Prenatal Diagnosis, 2010, 27(7):641-643.
8. Edwards A I , Civitello A A , Hammond H A , et al. DNA Typing and Genetic Mapping with Trimeric and Tetrameric Tandem Repeats[J]. The American Journal of Human Genetics, 1991, 49(4):746-756.
9. 张清健, 方俊宇, 朱志勇,等. 短串联重复序列连锁分析进行产前诊断前母血污染鉴定的研究[J]. 中国实验诊断学, 2015, 000(005):728-731.
10. 中华医学会医学遗传学分会临床遗传学组, 中国医师协会医学遗传医师分会遗传病产前诊断专业委员会, 中华预防医学会出生缺陷预防与控制专业委员会遗传病防控学组. 低深度全基因组测序技术在产前诊断中的应用专家共识[J]. 中华医学遗传学杂志, 2019, 36(4):293-296.
